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1、原理及适用范围 沙门氏菌属肠道细菌科,包括那些引起食物中毒、导致肠胃炎、伤寒和副伤寒的细菌。能引起食物传播性疾病,近年来,已经成为最常见的食物中毒原因。肠炎沙门氏菌感染通常源于奶制品、禽产品和肉产品;鸡肉和鸡蛋尤其是高风险食品。沙门氏菌感染的症状通常是肠胃出现问题,包括恶心、腹部绞痛、呕吐和腹泻,一般最多持续7天。在免疫力低下的人群中,如果不及时服用抗生素类药品,沙门氏菌感染将导致生命危险。
沙门氏菌测试片(FilmplateTM Salmonella BS205)含有选择性培养基、沙门氏菌特有辛酯酶的显色指示剂和高分子吸水凝胶,运用微生物测试片专有技术,做成一次性快速检验产品,一步培养15~24h就可确认是否带有沙门氏菌,非常适合各级检验部门和食品企业使用。本产品适用于肉和肉产品、蛋及蛋制品、冷饮等的快速检测。参照标准:食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验(GB 4789.4)。
2、操作方法 2.1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液。 2.2、接种:将沙门氏菌测试片(BS205)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右,使培养基凝固,每个样品接种两片。同时做一片空白阴性对照。 2.3、培养: 将测试片叠在一起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。
3、结果判读 对测试片进行观察,呈紫红色的菌落为沙门氏菌;呈蓝色的菌落为其他菌群。出现阳性菌落的样本,最好用其他更为可靠的方法进行验证,没有条件的至少要再取样重复检验一次。 4、结果报告 在25mL(或25g)样品中检出或未检出沙门氏菌。
5、附加说明 5.1、有关验证试验表明,接纯菌种(包括硫化氢阴性菌株)可以产生典型的紫红色菌斑,其他肠杆菌呈蓝色,葡萄球菌不生长。 5.2、测试片具有较强的敏感性,在1.5×10-8稀释度时仍可计算出菌落。临床实际应用结果显示阳性检出率高于分离培养法1.84‰,复查准确率提高约13.0%(中国卫生检验杂志2006,16(8):954-955)。 5.3、阳性确认试验推荐使用氧化酶试纸法,具体操作是:选择测试片上可疑的沙门氏菌菌落,在对应上盖膜上做好标记并编号。将氧化酶试纸贴在可疑菌落上,盖上上盖膜等待30s左右,如果氧化酶试纸颜色不变则为氧化酶阴性,可以报告25g样品沙门氏菌阳性,反之,试纸片变红,则氧化酶阳性,报告25g被检样品沙门氏菌阴性。 5.4、注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。
6、保存条件 本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为一年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水,最好在拆封前将整包回温至室温。
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